一、為什么需要分階段擴培？

小球藻的擴培需循序漸進，分一級、二級、三級逐級放大。原因在于：

1. 降低污染風險：直接大規(guī)模培養(yǎng)易受雜菌污染，分階段可逐步控制環(huán)境。

2. 優(yōu)化生長條件：不同階段的光照、通氣和營養(yǎng)需求不同，需針對性調整。

3. 提高成功率：逐級擴培能保證藻種活力，避免資源浪費。

 二、培養(yǎng)前的通用準備

 培養(yǎng)基選擇：推薦使用BG11培養(yǎng)基（含硝酸鹽、磷酸鹽、微量元素等），按配方配制后需高溫滅菌（121℃滅菌20分鐘）。

 藻種來源：選擇活性高、無污染的藻種，可從專業(yè)機構購買或自行保存。

 基礎設備：光照培養(yǎng)箱、通氣泵、pH計、顯微鏡、滅菌鍋等。

 三、分階段擴培操作詳解

 1. 一級擴培（實驗室小規(guī)模培養(yǎng)）

目標：激活藻種，獲得高純度基礎藻液。  

步驟：  

1. 接種：在無菌操作臺內，將藻種按20%比例接種到滅菌后的BG11培養(yǎng)基中（例如：100ml培養(yǎng)基加入20ml藻種）。  

2. 培養(yǎng)條件：  

    光照：2000-5000 lux（相當于日光燈下15-30cm距離），每日12小時光照/12小時黑暗。  

    溫度：25-30℃，避免劇烈波動。  

    通氣：輕微通氣（每秒12個氣泡）或每日手動搖瓶3-4次。  

3. 監(jiān)測與收獲：  

    每天觀察藻液顏色，正常應為鮮綠色；若發(fā)黃或渾濁，可能被污染。  

    3-5天后用顯微鏡檢查細胞密度，當藻液濃度達到5*10^6 cells/mL時，可轉入二級培養(yǎng)。

注意事項：  

 嚴格無菌操作，接種時佩戴口罩和手套。  

 定期測pH值，用稀鹽酸或氫氧化鈉調節(jié)至7.0-8.5。

 2. 二級擴培（中規(guī)模培養(yǎng)）

目標：擴大藻液體積，為規(guī)?；a(chǎn)做準備。  

步驟：  

1. 接種：將一級藻液按10-20%比例接入更大的培養(yǎng)容器（如5L玻璃罐）。  

2. 培養(yǎng)條件：  

    光照：5000-10000 lux（需補光燈輔助），維持12小時光暗周期。  

    溫度：25-30℃，夏季需注意降溫。  

    通氣：持續(xù)通入過濾空氣（每秒3-5個氣泡），避免CO?不足。  

3. 監(jiān)測與收獲：  

    每日檢測細胞密度（可用分光光度計測OD值），目標濃度10^7 cells/mL。  

    若藻液黏稠度增加，需補充新鮮培養(yǎng)基稀釋。

注意事項：  

 通氣管道需定期消毒，防止生物膜堵塞。  

 避免強光直射，可用遮光布調節(jié)光照強度。

 3. 三級擴培（大規(guī)模生產(chǎn)）

目標：實現(xiàn)工業(yè)化量產(chǎn)，適用于露天池或生物反應器。  

步驟：  

1. 接種：將二級藻液按10-20%比例接入大型培養(yǎng)系統(tǒng)（如1-2噸的光生物反應器）。  

2. 培養(yǎng)條件：  

    光照：自然光+人工補光，總強度5000-10000 lux。  

    溫度：25-30℃，露天池需加蓋遮陽網(wǎng)防高溫。  

    通氣：大功率氣泵持續(xù)供氧，必要時補充CO?（濃度15%）。  

3. 監(jiān)測與收獲：  

    每天檢測pH、溶氧量和營養(yǎng)鹽（硝酸鹽、磷酸鹽），及時補充消耗的營養(yǎng)。  

    當藻液濃度達10^7 cells/mL時，可離心或過濾采收。

注意事項：  

 露天培養(yǎng)需防雨水、灰塵和蟲害，可加裝防蟲網(wǎng)。  

 定期清理池壁，防止雜藻附著。

 四、常見問題與解決方案

1. 藻液發(fā)黃/發(fā)臭：可能是細菌污染，需丟棄并徹底消毒設備。  

2. 生長緩慢：檢查光照是否不足，或營養(yǎng)鹽（尤其是氮、磷）是否耗盡。  

3. 沉淀分層：增加通氣量，或補充微量元素（如鐵、鎂）。  

 五、總結

小球藻培養(yǎng)的成敗取決于無菌操作、環(huán)境控制和精準監(jiān)測。分階段擴培既能保證藻種活性，又能逐步適應生產(chǎn)條件。無論是實驗室研究還是商業(yè)開發(fā)，遵循科學的流程和細節(jié)管理，才能高效獲得優(yōu)質藻液。未來，隨著光生物反應器等技術的進步，小球藻的規(guī)?；瘧脤⒏迎h(huán)保和經(jīng)濟！  

小貼士：初次嘗試可從一級擴培開始，熟練后再逐步放大，避免資源浪費哦！

水產(chǎn)養(yǎng)殖戶塘口藻種擴培都有哪些問題？
塘口擴培小球藻，第一步：用漂白粉消毒池塘水或自來水。第二步：加入培養(yǎng)基后用大蘇打中和。第三步：接種，看到淡綠色即可。受到反饋，集中起來有以下幾個問題：

1、余氯的問題：

有過擴培經(jīng)驗的養(yǎng)殖戶打電話來問：一立方水，100克漂白粉消毒，50克大蘇打中和，會不會有余氯？在充氣均勻的情況下，根據(jù)我的經(jīng)驗沒有余氯。如果不放心，可以買一盒“余氯快速分析盒”檢測一下。大蘇打過量一點，對藻類生長沒有影響。

2、池塘水直接消毒能不能用？井水直接擴培可以嗎？

有自來水當然更好，如果池塘上沒有自來水，那就只好用池塘水。注意一點:池塘水在撒上漂白粉以后，會有大量死藻等泡沫出現(xiàn)，把表層撈走就可以了。還有人問直接用井水不消毒能不能擴培？藻類擴培的無菌狀態(tài)是關鍵，井水只是相對來說菌類少，并不是無菌狀態(tài)。相對來說，消毒水的時候，用20-30克漂白粉就可以，10-15克大蘇打中和。井水要充氣暴曬一天使用，加入漂白粉以后，有的井水會發(fā)紅，中和前，要把底部的鐵銹色絮狀沉淀除掉再使用。

3、培養(yǎng)基的問題

有時我們的養(yǎng)殖棚子上有塑料布會兜雨水，經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)長成濃綠色。雨水的污染少，頂棚光線好，空氣中的藻種落進去后，沒有肥，生長也很旺盛。

4、擴培卵囊藻行不行？
除了小球藻，塘口擴培別的藻種當然可以?，F(xiàn)在卵囊藻比較火，穩(wěn)水周期比小球藻還長，規(guī)?；囵B(yǎng)、活體濃縮和常溫保存等關鍵技術已經(jīng)突破，相關報道也很多，我就不多說了。不管是小球藻種還是卵囊藻或者硅藻（甚至有廠家打出的復合藻種），如果我們無菌下擴培不成功，這個藻種進入池塘則很難達到預期效果。

5、什么時候擴培藻種？

這個問題比較大?！氨R未動，糧草先行”，苗種階段，藻類就是糧草，多擴培一點，可以作為苗種的天然的開口料。但是因為我們的養(yǎng)殖模式和習慣操作的原因，比如，很多時候，放苗時還是一池清水?，F(xiàn)在市面上的肥水產(chǎn)品，不管是無機的還是有機的還是生物肥，都只是培養(yǎng)基而已。就好比我們種莊稼，肥再好也要有種子啊。這個時候，加入藻種就很關鍵。另外，一些地方的養(yǎng)殖戶喜歡定期消毒殺菌殺藻，或者天氣突變等造成的倒藻后，更是常常為肥水而苦惱。

個人建議：特別是一些小棚蝦池或高位池，藻相很難穩(wěn)定，可以直接購買光語公司的小球藻藻液，濃度高，方便實惠。